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创建时间:04-07

乳清多肽粉功能性研究

本实验以鳙鱼、青虾和梭子蟹为例研究了水产品中甲基汞反相萃取水产品中甲基汞含量的气质联用分析方法,实验结果表明该方法准确可靠,且操作简便、使用方便、避免了易制毒化学品使用、易于推广、检出限低等优点,甲基汞在酸性条件下,经过苯的萃取,再用3%L-半胱氨酸滤纸的富集吸附,滤纸条经过HCl的浸泡,最后通过苯的解析作用,经HP-5MS分离,SIM离子检测器检测,以保留时间和荷质比定性,峰面积定量。本方法在浸提液HCl的浓度、半胱氨酸浓度、滤纸浸泡时间及饱和半胱氨酸滤纸的制备、选择解析条件、色谱条件、方法的加标回收率、灵敏度等方面进行了系统的研究。研究结果表明浸提液HCl的浓度2mol/L,L-半胱氨酸浓度3%,滤纸浸泡时间20min,解析时用4mol/LHCl浸泡,进样口温度260℃,SIM离子检测器,负化合源:NCI时分离效果较好。甲基汞在9.3min是出峰,碎片质荷比234.00,237.00,239.00,甲基汞在0.1μg/mL~2μg/mL范围内有良好的线性关系,检出限为0.08μg/mL。本方法准确可靠、操作简便、易于推广、灵敏度高、重现性好和检出限低等优点,能满足水产品中甲基汞残留量检测的要求。
 
反相萃取法测定生物体中甲基汞含量的实验过程中浸提和解析对HCl浓度的要求非常高,这跟样品回收率密切相关,所以操作过程中要特别注意。
有机汞,特别是甲基汞是剧毒物质,它会使神经系统和肾脏发生障碍,皮肤直接接触甲基汞会导致死亡。甲基汞的标准溶液必须在通风橱中配制,并给予一定的保护,特别注意不要吸入甲基汞的蒸汽,含甲基汞的废液必须用特定的废液瓶进行收集。

用气质联用仪检测水产品中甲基汞含量这一方法,从质谱图观察,峰型还是存在拖尾的现象。一般如果柱子固定相的性质和极性如果选择不好会出现拖尾现象,进样量太大,温度过低等因素会造成峰型拖尾。但是本实验中选用HP-5MS  0.25mm*30m*0.25μm柱已经是比较成熟的了,进样量为1μL也不会太大,汽化温度也尽量高了,排除这些因素以外,我们今后还要继续探索这个问题。峰型还是比较不规则;峰型不规则可能是不连续操作,色谱柱内充有空气造成的。运用该方法操作有时候会存在一定的乳化现象,可以用少量的异丙醇进行消乳化。
针对以上存在的问题(峰型不规则),我们试图先将处理所得液经过凝胶渗透色谱(GPC)进行净化处理,然后再用气质联用仪检测各时间段甲基汞的检出量,用800ppm的标准样品进行试验得出如下结论:Pre time 1720min,接下去每1分钟收集一瓶,收集了8瓶,后处理30min,经过检测前面4瓶中甲基汞的含量分别为:3.05ng/ml,39.95ng/mL,517.2ng/mL,55.2ng/mL后4瓶没有收集到。由于时间的限制,没有进行进一步研究,之后可以往这一方面继续研究。
由于此方法有准确可靠、且操作简便、易于推广、灵敏度高、重现性好、检出限低等诸多优点,今后可以研究一种可以和L-半胱氨酸试剂结合并和甲基汞发生显色反应的一种螯合剂,这样可以更加方便进行快速检测。
 目  录
中文摘要    I
英文摘要    II
目录    III
1. 绪论    1
1.1  乳清产品的发展现状    1
1.2  功能食品的概念和发展过程    1
1.3  功能性短肽的生物学功能    2
     1.4  乳清多肽粉的主要营养成分    2
1.5  本课题的主要研究内容    3
1.6  本章小节    4
2. 实验部分    5
2.1  增强免疫力功能评价    5
2.1.1  项目    5
2.1.2  方法    5
2.2  缓解体力疲劳功能评价    5
     2.2.1  项目    5
     2.2.2  方法    6
2.3  调节肠道菌群功能评价    7
     2.3.1  项目    7
     2.3.2  方法    7
2.4   辅助抗肿瘤功能评价    7
     2.4.1  项目    7
2.5  抗氧化功能评价    8
     2.5.1  项目    8
     2.5.2  方法    8
2.6  降低胆固醇功能评价    8
     2.6.1  项目    8
     2.6.2  方法    8
2.7  辅助减肥功能评价    9
     2.7.1  项目    9
     2.7.2  方法    9
2.8  本章小节    9
3. 结果与讨论    11
3.1  增强免疫力功能评价结果    11
3.2  缓解体力疲劳功能评价结果    11
3.3  调节肠道菌群功能评价结果    11
3.4  辅助抗肿瘤功能评价结果    11
3.5  抗氧化功能评价结果    12
3.6  降低胆固醇功能评价结果    12
3.7  辅助减肥功能评价结果    12
3.8  本章小节    12
4.总结与展望    14
致谢    15
参考文献    16
 

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