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创建时间:07-16

葛根有效成分的提取与鉴别

 

此次研究主要对葛根的有效成分进行了提取与定性鉴别了葛根有效成分中葛根素的含量。采用醇提正交试验与紫外分光光度法测定总黄酮提取得率相结合的方法,得出了葛根有效成分提取的最佳醇提工艺路线。用水蒸气蒸馏法提取其中两味中药材中挥发油成分的方法合理有效,成功的提取了挥发油,并在冰箱内保存备用。对葛根有效成分的鉴别以葛根素为参考标准,在葛根素的薄层定性鉴别中,分析比较了多种展开剂的展开效果,并得出了理想的展开剂,有效的鉴别了葛根提取物中含有葛根素成分。
薄层色谱法只能作为一个定性鉴别的质量标准,其定量测定方法还有待于进一步考察摸索。葛根素的含量测定方法已见于报道的很多,如薄层扫描法、新型薄层内标法、荧光薄层扫描法和高效液相色谱法等。其中尤以高效液相色谱[16-19]使用最为广泛。
高效液相色谱具有高压(压力可达150~300 kg/cm2;色谱柱每米降压为75 kg/cm2以上)、高速(流速为0.1~10.0 mL/min)、高效(塔板数可达5000/m;在一根柱中同时分离成份可达100种)、高灵敏度(紫外检测器灵敏度可达0.01ng)的特点。使用高效液相色谱时,液体待检测物被注入色谱柱,通过压力在固定相中移动,由于被测物种不同物质与固定相的相互作用不同,不同的物质顺序离开色谱柱,通过检测器得到不同的峰信号,最后通过分析比对这些信号来判断待侧物所含有的物质。对于高沸点、热稳定性差、相对分子质量大(大于400以上)的有机物原则上都可用高效液相色谱法来进行分离、分析。
郝建莉等[16]采用HPLC外标法,测定以30%乙醇超声溶解提取葛根异黄酮胶囊的葛根素含量,固定相为Kromasil C18,流动相为甲醇-水(25:75),UV检测波长为250 nm。结果:葛根素溶液在9. 66~96. 60μg/ml浓度范围内浓度与峰面积成良好线性关系,r=0. 999 9,平均加样回收率为99. 51%, RSD=1. 55% (n=6)。
冯维希等[17]用高效液相色谱法测定云台山葛根的根、茎、叶及花中葛根素的含量,探讨其地上部分的利用价值。方法ODS色谱柱(150 mm×4.6 mm,5 m);柱温:4O℃ ;流动相:甲醇-水(27:73)(含0.5%的醋酸);流速为1.0 mL/min ;检测波长:250 nm。结果:葛根素的线性范围为10.O~ 160.0 mg/L,y=65.713x-11.932,r=0.9995,平均回收率为98.7%,RSD为1.5。
唐丽琴等[18]采用高效液相色谱法测定复方黄连颗粒中葛根素的含量,色谱柱为C18(4.6mm×250mm,5μm),检测波长为250nm,流动相为甲醇/水(30:70),流速为1.0mL/min,柱温为30℃。结果:葛根素在0.312μg~1.560μg范围内线性关系良好(r=0.9989)。葛根素的平均回收率为99.2%(RSD=2.08%,n=5)。
随着生活水平的提高,人们的健康意识也不断提高,天然绿色保健食品将倍受青睐。我国葛根资源丰富,开发葛根系列产品潜力大,市场广阔。对葛根活性成分的研究将不断阐明其构效关系、量效关系,这定会把葛保健食品推向新的高度。随着植物细胞工程的发展,用植物细胞培养方法生产葛根异黄酮也有着光明前途。利用转基因手段也有望提高葛中异黄酮的含量,增加其利用价值。

目  录

中文摘要    I
英文摘要    II
目录    III
1. 绪论    1
1.1  葛根的简介    1
1.2  葛根的国内外种值与利用情况    1    
1.3  葛根的利用价值    2
1.4  葛根有效成分提取与鉴别方法的研究现状    3
2. 实验部分    6
2.1 实验材料    6
2.1.1  实验原料    6
2.1.2  实验试剂    6
2.1.3  实验设备    7
2.2 提取工艺路线的选择    7
    2.2.1  醇提正交试验    7
    2.2.2  紫外分光光度法测定总黄酮含量    8
2.3 有效成分的提取    10
    2.3.1  水蒸气蒸馏法提取挥发油    10
    2.3.2  醇回流提取有效成分    11
2.4 葛根素的薄层色谱鉴别    12    
3. 结果与讨论    14
3.1 正交优选结果    14
3.2 醇回流提取分析    15
3.3 葛根素的定性分析结果    16    
4.总结与展望    18
致谢    20
参考文献    21

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