免费下载
网站简介

找论文变得更简单!

帮找论文

当前位置:

重点论文网    生物论文    动物论文    猪瘟病毒云南省流行毒株的RT-PCR鉴定
创建时间:08-25

猪瘟病毒云南省流行毒株的RT-PCR鉴定

 

摘    要

本试验参照GenBank中猪瘟病毒保守的NS3基因为靶序列,设计一对特异性引物,从本实验室保存的典型CSF症状的病料中应用RT-PCR技术扩增出NS3基因,将此片段克隆于pMD18-T载体中,筛选获得重组质粒pMD18-NS3,并对插入片段进行测序。结果表明,所扩增的片段与预期片段的大小相符,大约为790 bp的目的DNA条带,经过测序鉴定证实确实是猪瘟病的NS3基因。本试验为猪瘟病毒的检测以及进一步研究云南猪瘟病毒提供资料。
关键词:猪瘟病毒;NS3基因;RT-PCR 


RT-PCR Identification of Classical swine fever virus of the Prevalent Virulent Strain in Yunnan Province

 

ABSTRACT

One pair of special primer was designed and synthesized according to full sequences of Classical swine fever virus,Yunnan prevalent strain published in GenBank. The NS3 gene was amplified by RT-PCR from the typical classical swine fever endeictic disease material in laboratory preservation. The amplified fragment was inserted into pMD18-T and sequenced. Recombinant plasmid was named pMD18-NS3. The fragment size of NS3 gene amplified by RT-PCR matched with the expected result which was about 790bp. Sequencing result showed that the fragment was CSFV NS3 gene. The study provides useful data for detection of swine fever virus and further study on classical swine fever virus of the prevalent virulent strain in Yunnan province.
Key words: Classical swine fever virus;  NS3 Gene;  RT-PCR


 
猪瘟病毒云南省流行毒株的RT-PCR鉴定


1 引言 
猪瘟是由黄病毒科瘟病毒属的猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起的一种急性、热性、高度接触性传染病[1]。该病被世界动物卫生组织(OIE)列为A类传染病,为须申报的动物传染病之一,我国将其列为一类传染病[2]。CSFV 为有囊膜的单股正链 RNA,病毒粒子直径约40~60nm,基因组大小约12.3kb,仅含有一个大的开放读码框架(ORF),编码 3898 个氨基酸残基。近几年来,通过对瘟病毒的蛋白结构、核酸序列以及基因重组和表达等方面的深入研究,证明了该属病毒的基因结构、复制类型以及表达方式和黄病毒极为相似,应归属于黄病毒科(Flavivirirus)。因此,猪瘟病毒(CSFV)便归为黄病毒科瘟病毒属中的一个重要成员。目前,猪瘟的发生主要在亚洲、非洲、南美洲和欧洲的44个国家和地区。1997 年荷兰发生猪瘟,导致 1100 多万头猪被屠宰,造成了重大的经济损失[3]。东南亚地区特别在我国是全球猪瘟的重灾区,自20世纪20年代首次发现猪瘟以来,该病流行在我国就没有停止过,当前各省市均有猪瘟的流行,据统计,因各种疾病死亡的牲猪占饲养总数(1998年达8亿头)的8%-10%,其中约1/3由猪瘟致死,每年的经济损失在10亿元左右。近几年来猪瘟的流行和发病特点发生了较大变化,猪瘟病毒可在扁桃体长期存在,调查证实扁桃体中CSFV带毒很严重。
CSF的暴发通常会造成巨大的经济损失,因此世界各国均制定了严格的猪瘟防控措施。这些措施通常包括以下几个方面:追踪和监测以确定疫病的来源和影响的范围,划定感染的和无猪瘟的区域,严格的隔离和流动控制,净化以消灭传染源。猪瘟防控措施的采取取决于家养猪和野猪群的猪瘟发生率和普遍程度。在那些猪瘟呈地方性流行的国家,使用疫苗是防控猪瘟的有效手段,对减少经济损失起到了重要作用。
目前,关于猪瘟病毒结构蛋白的功能研究已经很清楚,但非结构蛋白的研究不是很多。而NS3是猪瘟病毒非结构蛋白中研究的比较多、功能了解也比较清楚的。研究证明,NS3是所有瘟病毒属中同源性最高的一段保守序列蛋白[4]。NS3蛋白在病毒的复制、蛋白的加工及转录过程中以及对宿主细胞的CPE中起着重要的作用[5]。而且,通过体外表达蛋白建立的体外非细胞反式切割

最新论文

网站导航

热门论文